Lorsqu’il suspecte un carcinome épidermoïde cutané, le médecin peut effectuer une biopsie, qui consiste à prélever un fragment de peau afin de l'analyser au microscope. La biopsie s’effectue sous anesthésie locale. Si, après analyse, on constate que des cellules cancéreuses sont bien présentes dans l’échantillon de tissu cutané, un traitement à visée curative est alors programmé.
Si la lésion est, dès le départ, clairement identifiée comme cancéreuse ou à très haut risque de l’être, le médecin peut procéder directement à sa résection chirurgicale complète plutôt qu’à une biopsie. Il enlève alors au bistouri l’intégralité de la tumeur visible ainsi qu’une zone environnante de peau saine, pour avoir une «marge de sécurité». Le tissu prélevé est envoyé au laboratoire pour être analysé au microscope. Cette analyse de la pièce chirurgicale permet à la fois de poser un diagnostic et de vérifier, en cas de tumeur cancéreuse confirmée, que toutes les cellules cancéreuses ont bien été enlevées.
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